Déterminer la structure 3D d'une protéine biologiquement importante

Procédure

Trouver quelques protéines pertinentes à vos cours

Attention

pas toutes les structures 3D contiennent toutes les chaînes qui composent une macromolécule in vivo (exemple hémoglobine: beaucoup de structures 3D contiennent 2 chaînes au lieu des 4...) pas toutes les structures 3D contiennent les ‘vraies’ chaînes qui composent une macromolécule in vivo (artéfact expérimental. Exemple hémoglobine : 4 x la même chaîne au lieu de 2 chaînes A et 2 chaînes B) pas toutes les structures 3D ‘couvrent’ toute la longueur de la chaîne peptidique !

1. choisir de préférence les structures 3D proposées à partir de ce poster MM PDB http://mm.rcsb.org/

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  Poster PDB proteines (thumb)
• pour les protéines avec médicaments : choisir les structures 3D proposées par PDB (à partir de ce poster) http://pdb101.rcsb.org/browse/you-and-your-health
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    Poster de quelques protéines en lien avec la santé chez PDB.org
• Liste proposée au cours de formation continue PO 422 avec Dr. Marie-Claude Blatter du SIB
  • http://education.expasy.org/cours/PO422/PO422_Liste_3D.pdf

Nom de la protéine ou du complexe	Lien vers UniProtKB/Swiss-Prot (section structure)	Lien vers l’entrée PDB (PDB AC) http://www.rcsb.org/3d-	Photo	Remarque	Fichier .STL prêt à imprimer - imprimée par Julien Dacosta TECFA et Bertrand Emery (Collège Calvin)
Hemoglobine Humaine	HBB_HUMAN HBA_HUMAN	1a00 4hhb* 2hhb	Hemoglobine complète imprimée en 3D à partir de 2hhb sur PDB (2x2 sous-unités en rouge groupements hème en blanc)	L’hémoglobine est constituée de 2 chaînes HBA et 2 chaînes HBB
COX1 + aspirine COX1 + ibuprofen	PGH1_SHEEP	1pth* 1eqg
Insuline Humaine	INS_HUMAN	2hiu* 1ben		L’insuline est constituée de 2 chaînes (chaîne A : 21 aa, chaîne B : 30 aa). Dans l’entrée 2hiu, la chaîne B ne fait que 29 aa...
Nucléosome (humain)	H4_HUMAN	5b40		La structure 3D contient les histones H4, H2A, H2B, H3.2 + ADN
Nucléosome (batracien)	4_XENLA	1aoi*		H4, H2B11, H33C, H2A1 + ADN
Immuno-globuline IgG	GCAA_MOUSE IGH1M_MOUSE	1igt* 1igy	Immunoglobuline G imprimée en 3D à partir de 1igy sur PDB
ATP Synthase	ATPB_BOVIN	5ara*		Plusieurs sous-unités inclue ATP5B Plus d’info : pdb101.rcsb.org/mot m/72
tRNA	N'est pas une protéine !	4tna	Impression 3D de l'ARNt Phe sur le poster de PDB	yeast tRNAPhe
TP53 + DNA	P53_HUMAN	3q06		393 aa : à l'heure de produire ce document aucune structure 3D ne couvre toute la séquence de la protéine
RNA polymérase	RPAB4_YEAST	2e2i*		Plusieurs sous-unités + DNA + RNA
Anthrax	LEF_BACAN	1j7n
Protéine fluorescente de méduse	GFP_AEQVI	1gfl		Séquence et structure complètes (blue GFP) Green GFP
Répresseur opéron lactose	LACI_ECOLI	1lbh		Multimère de la même chaîne
CFTR Protéine dont le défaut cause la mucoviscidose	CFTR_HUMAN P13569	5uak	CFTR - forme normale - imprimée en 3d à partir de 5uak sur PDB	cf. Scénario pour trouver la mutation la plus fréquente la ∂F508 cause la plus fréquente de la mucoviscidose) dans une puce à ADN (µ-array)
CRISPR-Cas9		5F9R	Protéine Cas9 en 3D à partir de la structure 5F9R sur PDB avec fermeture éclair comme modèle de l'ADN et l'ARN guide	La fermeture éclair de taille grossière se trouve en mercerie ou récupérer sur un habit / sac.
Spike protein du virus SARS-Cov-2		5wrg
Récepteur à l'acétycholine-		2bg9	Récepteur à l'acétycholine imprimé en 3D à partir de la structure 2bg9 sur PDB

http://tecfa.unige.ch/perso/lombardf/formcont/proteines-3D/exemples-pdb-to-stl/

Ces structures ont été choisies en collaboration entre Dr. M.C.Blatter du SIB et F. Lombard (IUFE TECFA) et imprimées par Julien Dacosta, Vincent Widmer, Stephane Morand de TECFA, coordonné par Prof. Daniel K. Schneider TECFA.

Exemples de questions pour TP de biologie / pour s’en inspirer

• On dit parfois que la séquence d’acides aminés (a.a) détermine la fonction de la protéine. En quoi est-ce correct et en quoi cela est-il incomplet ?
• Comment la structure secondaire et tertiaire est-elle établie avec ce que vous avez pu voir jusqu’ici ? ( dans quels organites ? Comment ?)
• Peut-on actuellement prédire la forme que prendra une protéine à partir de sa séquence ?

• Comment détermine-t-on la forme que prend effectivement une protéine ?
• Comment la forme constatée détermine-t-elle l’activité de la protéine ?
• Comparez la séquence sur UniProtKB, puis la forme 3D pour diverses protéines:
  • Insuline (http://www.rcsb.org/structure/1ben )
  • Immunoglobuline IgG ( http://www.rcsb.org/structure/1igy)
• Quelles parties de la forme de l’hormone, l’anticorps semble être en rapport avec leur fonction ?
• La forme détermine-t-elle seule la fonction ?
• Essayez de déterminer comment la forme d’un anticorps Ig détermine sa fonction ?
• Pour ces deux protéines, quelles parties de la protéine pourraient – à votre avis - changer un peu suite à une mutation sans gravement mettre en cause son fonctionnement et finalement réduire la fécondité de l'animal qui a ce génome-là ?
• Pour quelles autres parties un changement risque-t-il de nuire au fonctionnement de la protéine ?
  • Idem pour l’histone? HIST1H4A
  • Idem pour l’insuline INS
  • Idem pour le récepteur à la mélanotropine MC1R
• Concluez sur le lien entre forme et fonction, les limites du modèle « clé- serrure »

Scénarios pédagogiques où il peut s'intégrer

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