Mutagenèse 3BIOS03 12/13
(D'après Exp 7 : Mutagenèse - Bioutils)
L'irradiation par les rayons ultraviolets (UV) provoque la formation de nombreuses modifications de l'ADN et est responsable de la majorité des cancers de la peau.Selon leurs longueurs d’onde les rayons UV sont classés en 3 catégories :
- Les UVA (320-400 nm). Ce sont les moins énergétiques. Ils induisent cependant des modifications de l’ADN de manière indirecte.
- Les UVB (280-320 nm). Ils pénètrent profondément dans les tissus et sont directement absorbés par l’ADN. Ils induisent la formation de dimère de pyrimidine. La plus grande partie du pouvoir cancérigène de la lumière solaire est due aux UVB.
- Les UVC (200-280). Ce sont les plus énergétiques. Ils sont cependant absorbés par la couche d’ozone et n’atteignent pas la surface de la Terre. Ils forment des modifications similaires aux UVB sur l’ADN.
Les dimères de pyrimidines sont formés entre des résidus adjacents (dimère de thymines, dimère de cytosines ou dimère thymine-cytosine). Ils sont à l'origine de mutations dans l’ADN.
La photolyase est une enzyme activée par la lumière du jour qui permet de réparer les dimères de pyrimidine. Ce processus de réparation est dénommé la photoréversion. La photolyase existe chez presque tous les organismes vivants exceptés les mammifères euthériens (à placenta) tel que l’humain (dommage!). Les UV induisent également plusieurs autres types de mutations "ponctuelles~" ainsi que des réarrangements des chromosomes.
Thèmes : Mutations, UV, courbe de survie, biosynthèse de l’adénine, gène ade2, photoréversion.
Répartition des expériences
Groupe A, B, C : Lili, Jamille - Nelson, Hedayat - William, Yannick
3) Mutagenèse
- 5 boîtes YPD.
- Exposer aux UV (10, 20, 30 et 40 secondes) - boîtes laissées à l'obscurité.
- 1 boîte contrôle non exposée (témoin de l'expérience).
- Incuber 5 à 7 jours à 30°C.
Groupe D, E : Antonio, Adii - Stéphanie, Joana
4A) Test des crèmes solaires
- 5 boîtes YPD.
- recouvrir d'un film alimentaire.
- étaler la(les) crème(s) solaire(s) différente(s).
- exposer 40 secondes aux UV.
- 1 boîte contrôle avec film alimentaire mais sans crème exposée aux UV.
- Incuber 5 à 7 jours à 30°C.
Groupe F, G : Vincent, Thierry - Antoine, Lorentz
4B) Taux de photoréversion
- 3 boîtes YPD.
- 1 boîte exposée 30 sec. UV puis forte lumière tout de suite après.
- 1 boîte exposée 30 sec. UV puis obscurité pendant 15 minutes.
- 1 boîte contrôle sans UV.
- Incuber 5 à 7 jours à 30°C.
Hypothèses 3BIOS03
Groupe A : Lili - Jamille
- Plus la durée d'exposition des levures aux UV est longue, moins il y aura de survivants
- Plus la durée d'exposition des levures aux UV est longue plus il y aura de colonies blanches.
Abordez le rapport entre le nombre de colonies rouges et blanches.
Groupe B : Nelson - Hedayat
- Dans un premier temps, nous aimerions transformer les colonies mutées en colonies revertants grâce à l'exposition aux UVs.
- L'effet secondaire des UVs tuent la plupart des colonies.
- Nous allons chercher à démontrer que le temps d'exposition aura un impact sur les colonies.
Ceci n'est pas une hypothèse, mais plutôt un mélange de but et contexte théorique. Reformulez de vrais hypothèses...
Groupe C : William - Yannick
- Plus les levures ade2 sont exposées aux UVs, plus il y aura de revertants capables de produire de l'adénine et donc croître.
- Plus les levure sont exposées aux UVs, plus le taux de survue sera faible.
Mentionnez la notion de durée dans vos hypothèses. Vous avez exposé vos UVs pendant 0' 10' 20' 30'et 40'.
Groupe D : Antonio - Adi
- Plus l'indice de protection est élevé, plus la crème filtrera plus les UV.
- Si il n'y a moins d'UV, alors on observera moins de revertants et donc plus de colonies rouges.
- Si beaucoup d'UV passent, alors nous aurons plus de revertants et donc de colonies blanches.
Discutez aussi du taux de survie
Groupe E : Stéphanie - Joana
- Plus l'indice de protection est élevé, plus il filtre les UV et donc il y aura un plus grand nombre de colonies et moins de colonies revertantes (blanches).
La notion de taux de survie doit être abordé dans l'hypothèse
Groupe F : Vincent - Thierry
- La boîte YPD exposée à la lumière après avoir été exposée aux UVs aura plus de revertants que la boîte YPD mise à l'obscurité.
Relire la théorie! La lumière active la photolyase qui répare les dimères...
Groupe G : Antoine - Lorentz
- Les boîtes exposées à la lumière après un traitement aux UV auront plus de survivants car la photolyase est activée par la lumière et répare l'ADN endommagé.
- Le nombre de revertants sera plus important dans les boîtes à l'obscurité car la photolyase non activée ne répare pas l'ADN endommagé et donc le nombre de mutations sera plus grand ; la probabilité de trouver des revertants sera plus élevés.
Résultats 3BIOS03
Groupe A :
- 10 secondes : Nombre total de colonies : 7 / nombre de colonies blanches : 7
- 20 secondes : Nombre total de colonies : 9 / nombre de colonies blanches : 9
- 30 secondes : Nombre total de colonies : 14 / nombre de colonies blanches : 14
- 40 secondes : Nombre total de colonies : 7 / nombre de colonies blanches : 7
- Contrôle : Nombre total de colonies : 16 / nombre de colonies blanches : 16
Groupe B :
- 10 secondes : Nombre total de colonies : 5 / nombre de colonies blanches : 5
- 20 secondes : Nombre total de colonies : 14 / nombre de colonies blanches : 11
- 30 secondes : Nombre total de colonies : 14 / nombre de colonies blanches : 8
- 40 secondes : Nombre total de colonies : 17 / nombre de colonies blanches : 9
- Contrôle : Nombre total de colonies : 18 / nombre de colonies blanches : 14
Groupe C :
- 10 secondes : Nombre total de colonies : 11 / nombre de colonies blanches : 10
- 20 secondes : Nombre total de colonies : 10 / nombre de colonies blanches : 8
- 30 secondes : Nombre total de colonies : 16 / nombre de colonies blanches : 7
- 40 secondes : Nombre total de colonies : 14 / nombre de colonies blanches : 13
- Contrôle : Nombre total de colonies : 10 / nombre de colonies blanches : 8
Groupe D :
- 40 sec. UV sans Crème : Nombre total de colonies : 45 / nombre de colonies blanches : 45
- 40 sec. UV + Crème 15 : Nombre total de colonies : 8 / nombre de colonies blanches : 8
- 40 sec. UV + Crème 30 : Nombre total de colonies : 120 / nombre de colonies blanches : 120
- 40 sec. UV + Crème 50 : Nombre total de colonies : 50 / nombre de colonies blanches : 50
Groupe E :
- 40 sec. UV sans Crème : Nombre total de colonies : 6 / nombre de colonies blanches : 3
- 40 sec. UV + Crème 15 : Nombre total de colonies : 6 / nombre de colonies blanches : 3
- 40 sec. UV + Crème 30 : Nombre total de colonies : 8 / nombre de colonies blanches : 6
- 40 sec. UV + Crème 50 : Nombre total de colonies : 12 / nombre de colonies blanches : 10
Groupe F :
- UV + Lumière forte : Nombre total de colonies : 15 / nombre de colonies blanches : 14
- UV + 15 min. obscurité : Nombre total de colonies : 17 / nombre de colonies blanches : 15
- Contrôle : Nombre total de colonies : 18 / nombre de colonies blanches : 18
Groupe G :
- UV + Lumière forte : Nombre total de colonies : 27 / nombre de colonies blanches : 14
- UV + 15 min. obscurité : Nombre total de colonies : 26 / nombre de colonies blanches : 17
- Contrôle : Nombre total de colonies : 15 / nombre de colonies blanches : 11