Mutagenèse 3BIOS02 12/13
(D'après Exp 7 : Mutagenèse - Bioutils)
L'irradiation par les rayons ultraviolets (UV) provoque la formation de nombreuses modifications de l'ADN et est responsable de la majorité des cancers de la peau.Selon leurs longueurs d’onde les rayons UV sont classés en 3 catégories :
- Les UVA (320-400 nm). Ce sont les moins énergétiques. Ils induisent cependant des modifications de l’ADN de manière indirecte.
- Les UVB (280-320 nm). Ils pénètrent profondément dans les tissus et sont directement absorbés par l’ADN. Ils induisent la formation de dimère de pyrimidine. La plus grande partie du pouvoir cancérigène de la lumière solaire est due aux UVB.
- Les UVC (200-280). Ce sont les plus énergétiques. Ils sont cependant absorbés par la couche d’ozone et n’atteignent pas la surface de la Terre. Ils forment des modifications similaires aux UVB sur l’ADN.
Les dimères de pyrimidines sont formés entre des résidus adjacents (dimère de thymines, dimère de cytosines ou dimère thymine-cytosine). Ils sont à l'origine de mutations dans l’ADN.
La photolyase est une enzyme activée par la lumière du jour qui permet de réparer les dimères de pyrimidine. Ce processus de réparation est dénommé la photoréversion. La photolyase existe chez presque tous les organismes vivants exceptés les mammifères euthériens (à placenta) tel que l’humain (dommage!). Les UV induisent également plusieurs autres types de mutations "ponctuelles~" ainsi que des réarrangements des chromosomes.
Thèmes : Mutations, UV, courbe de survie, biosynthèse de l’adénine, gène ade2, photoréversion.
Répartition des expériences
Groupe A, B, C : Antoine, Alexander - Chae Hyun, Lisa - Catia, Sarunja
3) Mutagenèse
- 5 boîtes YPD.
- Exposer aux UV[365nm] / 254[nm] (10, 20, 30 et 40 secondes) - boîtes laissées à l'obscurité.
- 1 boîte contrôle non exposée (témoin de l'expérience).
- Incuber 5 à 7 jours à 30°C.
Groupe D, E : Cédric, Valentine - Kevin, Thomas
4A) Test des crèmes solaires
- 5 boîtes YPD.
- recouvrir d'un film alimentaire.
- étaler la(les) crème(s) solaire(s) différente(s).
- exposer 40 secondes aux UV.
- 1 boîte contrôle avec film alimentaire mais sans crème exposée aux UV.
- Incuber 5 à 7 jours à 30°C.
Groupe F, G : Brikene - Nelson, David
4B) Taux de photoréversion
- 3 boîtes YPD.
- 1 boîte exposée 30 sec. UV puis forte lumière tout de suite après.
- 1 boîte exposée 30 sec. UV puis obscurité pendant 15 minutes.
- 1 boîte contrôle sans UV.
- Incuber 5 à 7 jours à 30°C.
Hypothèses 3BIOS02
Groupe A :
- Plus le temps d'irradiation est long (moins il y a de chance qu ça se développe
????) moins il y a de survivants car ça modifie les gènes des levures (ADN)
- Plus le temps d'irradiation est long plus le taux de mutations est grand, car les UV modifient les levures.
- Puisqu'ils étaient déjà mutants, il est possible que les modifications dues à l'irradiation des gènes entraîne des revertants
Soyez plus explicite et élaborez des hypothèse vérifiables ; ici les nombres de colonies de levures.
Groupe B :
- 10 sec : Ce temps n'est pas assez long pour tuer toutes les bactéries -> des mutations extragéniques auront lieu, car les 3 premiers sont des cas rares.
- 20 sec : Ce temps n'est pas assez long non plus pour pouvoir tuer les bactéries. Au lieu de cela une mutations extragénique va se passer.
Vous travaillez avec des LEVURES ! Formulez de vrais hypothèses vérifiables.
Groupe C :
- Plus la durée de l'exposition est longue, plus on a de chance de réparer le bon dimère et donc de réactiver la biosynthèse d'Adénine. Mais il y aura plus de chance de muter un autre gène et influencer la survie des levures.
- Les levures non exposées aux UV n'auront pas de chance d'avoir des dimères réparés.
Les mutants ade2 sont-ils le résultats de la formation d'un dimère ?? NON. La mutation est stabilisée...
Aborder les notions de survivants et de revertants ; reformulez vos hypothèses
Groupe D :
- Plus l'indice est élevé plus il y aura de colonies
- Les crèmes solaires ne marchent pas sous les UVC -> il n'y aura pas de colonies
Soyez pus explicite
Vérifiez l'hypothèse des UVC
Groupe E :
Groupe F :
Groupe G :
Résultats 3BIOS02
Groupe A :
- 10 secondes : Nombre total de colonies : 491 / nombre de colonies blanches : 5
- 20 secondes : Nombre total de colonies : 693 / nombre de colonies blanches : 0
- 30 secondes : Nombre total de colonies : 658 / nombre de colonies blanches : 2
- 40 secondes : Nombre total de colonies : 533 / nombre de colonies blanches : 10
- Contrôle : Nombre total de colonies : 531 / nombre de colonies blanches : 2
Groupe B :
- 10 secondes : Nombre total de colonies : 596 / nombre de colonies blanches : 0
- 20 secondes : Nombre total de colonies : 555 / nombre de colonies blanches : 1
- 30 secondes : Nombre total de colonies : 606 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 secondes : Nombre total de colonies : 528 / nombre de colonies blanches : 1
- Contrôle : Nombre total de colonies : - / nombre de colonies blanches : -
Groupe C :
- 10 secondes : Nombre total de colonies : ? / nombre de colonies blanches : ?
- 20 secondes : Nombre total de colonies : 518 / nombre de colonies blanches : 11
- 30 secondes : Nombre total de colonies : 603 / nombre de colonies blanches : 11
- 40 secondes : Nombre total de colonies : 619 / nombre de colonies blanches : 3
- Contrôle : Nombre total de colonies : 654 / nombre de colonies blanches : 6
Groupe D :
- 40 sec. UV sans Crème : Nombre total de colonies : 68 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 sec. UV + Crème 15 : Nombre total de colonies : 74 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 sec. UV[365nm] + Crème 30 : Nombre total de colonies : 76 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 sec. UV[254nm] + Crème 30 : Nombre total de colonies : 82 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 sec. UV + Crème 50 : Nombre total de colonies : 72 / nombre de colonies blanches : 0
Groupe E :
- 40 sec. UV sans Crème : Nombre total de colonies : 506 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 sec. UV + Crème 15 : Nombre total de colonies : 775 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 sec. UV + Crème 30 : Nombre total de colonies : 500 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 sec. UV[365nm] + Crème 50 : Nombre total de colonies : 820 / nombre de colonies blanches : 0
- 40 sec. UV[254nm] + Crème 50 : Nombre total de colonies : 220 / nombre de colonies blanches : 0
Groupe F :
- UV(365nm) + Lumière forte : Nombre total de colonies : 75 / nombre de colonies blanches : 0
- UV(254nm) + Lumière forte : Nombre total de colonies : 0 / nombre de colonies blanches : 0
- UV[365nm] + 15 min. obscurité : Nombre total de colonies : 78 / nombre de colonies blanches : 0
- UV[254nm] + 15 min. obscurité : Nombre total de colonies : 0 / nombre de colonies blanches : 0
- Contrôle : Nombre total de colonies : 456 / nombre de colonies blanches : 0
Groupe G :
- UV(365nm) + Lumière forte : Nombre total de colonies : 514 / nombre de colonies blanches : 4
- UV(254nm) + Lumière forte : Nombre total de colonies : 3 / nombre de colonies blanches : 2
- UV[365nm] + 15 min. obscurité : Nombre total de colonies : 714 / nombre de colonies blanches : 1
- UV[254nm] + 15 min. obscurité : Nombre total de colonies : 0 / nombre de colonies blanches : 0
- Contrôle : Nombre total de colonies : 518 / nombre de colonies blanches : 0